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色谱法分离基本原理

色谱法原理又称“色谱分析"、“色谱分析法"、“层析法",是一种分离和分析方法,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。


色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。
色谱法起源于20世纪初,1950年代之后飞速发展,并发展出一个独立的三级学科-色谱学。
1952年英国科学家阿切尔・马丁(Archer JohnPorter Martin 1910~)、理查德・辛格(Richard LaurenceMillington Synge ,1914-)因发明分配色谱分离法而共同获得诺贝尔化学奖? ,此外,色谱分析方法还在12项获得诺贝尔化学奖的研究工作中起到关键作用。


色谱分离基本原理:
由以上方法可知,在色谱法中存在两相,一相是固定不动的, 们把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相, 们把它叫做流动相。

色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。

使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。
当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。

由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中先后流出。
与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。


色谱法原理应用:
色谱法的应用可以根据目的分为制备性色谱和分析性色谱两大类。

制备性色谱的目的是分离混合物,获得一定数量的纯净组分,这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。
相对于色谱法出现之前的纯化分离技术如重结晶,色谱法能够在一步操作之内完成对混合物的分离,但是色谱法分离纯化的产量有限,只适合于实验室应用。

分析性色谱的目的是定量或者定性测定混合物中各组分的性质和含量。
定性的分析性色谱有薄层色谱、纸色谱等,定量的分析性色谱有气相色谱、高效液相色谱等。
色谱法应用于分析领域使得分离和测定的过程合二为一,降低了混合物分析的难度缩短了分析的周期,是比较主流的分析方法。
在药典中,共有超过约600种化学合成药和超过约400种中药的质量控制应用了高效液相色谱的方法。


色谱法原理的特点是:
1、分离效率高。
可分离性质十分相近的物质,可将含有上百种组分的复杂混合物进行分离。

2、分离速度快。
几分钟到几十分钟就能完成一次复杂物质的分离操作。

3、灵敏度高。
能检测含量在10-12克以下的物质。

4、可进行大规模的纯物质制备。


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